ترسیم نقشه بیان ژنهای ابرخانواده adamts-1-10 و adamtsl-5-7 در باغتهای مختلف چشم انسان

نقش ماتریکس خارج سلولی (extra cellular matrix:ecm) در اختلالات و بیماری های چشمی روز به روز آشکارتر می شود. نقش adamtss و سایر اجزاء ecm مانندltbps ، فیبریلین ها و کلاژن ها در بیماری های مختلف چشمی مانند گلوکوم، اکتوپیا لنتیس، آرتریتیس و دیستروفی قرنیه تاکنون به اثبات رسیده است. از آنجایی که اطلاعات کمی در مورد بیان ژن های ابرخانواده adamts-1-10 و adamtsl-5-7 در بافت های مختلف چشم وجود دارد و با توجه به اهمیت این ابرخانواده در اختلالات چشمی، ما در این مطالعه قصد داریم توزیع بیان این ژن ها را در بافت های مهم چشم (شبکه ترابکولار، عدسی، لایه رنگدانه ای شبکیه، لایه ماکولای شبکیه و عصب بینایی) بررسی کنیم. بیان ژن ها نقش کلیدی در شکل گیری ساختار و عملکرد بافت ایفاء می کنند. بنابراین نمایش الگوی بیان ژن های مهم در بافت، شناخت ما را از فیزیولوژی و پاتولوژی آن افزایش خواهد داد. در این مطالعه 5 بافت (شبکه ترابکولار، عدسی، لایه رنگدانه ای شبکیه، ماکولا و عصب بینایی) در 9 چشم از 3 رده سنی، <3، 20-50 و >50، مورد بررسی قرار گرفت. rna بافت ها با استفاده از trizol و طبق دستور ارائه شده توسط کارخانه سازنده انجام شد. کیفیت rna های استخراج شده با استفاده از نسبت باند 28s به 18s مورد بررسی قرار گرفت. سنتز cdna با استفاده از avian myeloblastosis virus reverse transcriptase (cinnagen) و random hexamers طبق دستورالعمل ارائه شده توسط کارخانه ساخته شد. real time pcr با استفاده از دستگاه corbett 65h0 (corbett research, sidney, australia) و با استفاده از quantifast sybr green pcr kit (qiagen, germantown, md) انجام پذیرفت. dnaها در سیکل های °c95 بمدت 15 ثانیه، °c55 بمدت 25 ثانیه و °c72 بمدت 25 ثانیه تکثیر شدند. اختصاصیت محصولات pcr با آنالیز منحنی های ذوب و بررسی بر روی ژل آگارز مورد بررسی قرار گرفت. gapdh بعنوان ژن کنترل برای آزمایشات real time pcr مورد استفاده قرار گرفت. ژن های adamts-1، -2، -3، -5، -9 و -10 در شبکه ترابکولار، ژن های adamts-1، -2،-5، -8 و adamtsl-5در عدسی، ژن های adamts-1، -2، -3، -6، -7، -8، -9 و adamtsl-5در لایه رنگدانه ای شبکیه، ژن-های adamts-1، -2، -3، -8 و adamtsl-5در ماکولا و ژن های adamts-1، -2، -3، -6، -8 و adamtsl-5در عصب بینایی بیان بالایی را نشان دادند. ما در این مطالعه برای اولین بار نشان دادیم که بسیاری از این ژن های این ابرخانواده در چشم بیان می شوند.